Anaranjado G
- Principio
El Anaranjado G (Orange G), también conocida como Naranja Gelb, es un valioso colorante azoico sintético utilizado en numerosas formulaciones de tinción, principalmente en técnicas histológicas.
Su uso principal se encuentra en la tintura OG-6 Papanicolaou usada en la coloración de la keratina, sin embargo también es uno de los componentes principales usados en la tintura de los tests de polen.
A menudo el Naranja G (Orange G) también es combinado junto a tinturas amarillentas en soluciones alcohólicas para tintar eritrocitos en métodos de tricromía, y en la demostración de células en el páncreas y la pituitaria.
Su fórmula química es C₁₆H₁₀N₂Na₂O₇S₂.
- Preparaciones
Preparación 1.
Fórmula:
Solución de trabajo de Anaranjado G
Para preparar aprox. 100 ml de solución se añaden juntos:
Anaranjado G
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0,5 g
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Etanol
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100 ml
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disolver
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Ácido fosfowolfrámico hidrato
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0,015 g
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añadir y revolver hasta que se haya disuelto todo
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La solución de colorante recién preparada debe filtrarse antes de su uso.
Procedimiento:
Tinción en la cubeta de tinción
Los portaobjetos han de ser inmersos y movidos brevemente en las soluciones, la simple introducción proporcionará resultados de tinción insuficientes.
Los portaobjetos deberían ser escurridos bien por goteo después de los diferentes pasos de tinción, de esta manera se podrá evitar el innecesario arrastre de soluciones.
Para conseguir un óptimo resultado de tinción, deberían respetarse los períodos indicados.
Portaobjetos con frotis fijado
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Etanol 96 %*
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10 segundos
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Etanol 80 %*
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10 segundos
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Etanol 70 %*
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10 segundos
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Etanol 50 %*
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10 segundos
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Agua destilada
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20 segundos
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Solución de Papanicolaou 1a solución de hematoxilina según Harris
o
Solución de Papanicolaou 1b solución de hematoxilina S |
3 minutos
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Agua corriente del grifo
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3 minutos
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Etanol 70 %
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30 segundos
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Etanol 80 %
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30 segundos
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Etanol 96 %
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30 segundos
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Solución de trabajo de Anaranjado G
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3 minutos
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Etanol 96 %
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30 segundos
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Etanol 96 %
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30 segundos
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Solución 3a de Papanicolaou solución polícroma EA 31 o
Solución 3b de Papanicolaou solución polícroma EA 50 |
3 minutos
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Etanol 96 %
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30 segundos
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Etanol 96 %
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30 segundos
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Etanol 100 %
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5 minutos
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Mezcla de: Etanol 100 % + Neo-Clear® o xileno (1 + 1)
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2 minutos
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Clarificar con Neo-Clear® o xileno.
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5 minutos
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Clarificar con Neo-Clear® o xileno.
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5 minutos
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Montar con Neo-Mount® los preparados humedecidos con Neo-Clear®, o los preparados humedecidos con xileno con p.ej. Entellan® Nuevo y cubre-objetos.
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