Azul de toluidina

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  • Principio
El azul de toluidina o cloruro de tolonio (según el INN), a veces abreviado como TBO) es un colorante catiónico (básico) metacromático de color azul, utilizado en histología y algunas veces en el ambiente clínico. El compuesto es un derivado del aminotoluol, compuesto homólogo de la anilina derivada del toluol. Se encuentra químicamente emparentado con el Azure A, Azure B y Azure C.
Su fórmula molecular es: C15H16N3CIS.
  • Preparaciones
Preparación 1.

 Preparación del reactivo 

Solución de Azul de toluidina 0,1 % 
Para preparar aprox. 100 ml de solución se añaden juntos: 

Azul de toluidina  
0,1 g 
Agua destilada 
100 ml 
disolver y filtrar 

La solución de colorante recién preparada debe filtrarse antes de su uso. 

 Procedimiento:
Técnica - Tinción nuclear/tinción de conjunto

Desparafinar de forma habitual los preparados histológicos y rehidratar en serie descendente de alcohol. 

Los portaobjetos deberían ser escurridos bien por goteo después de los diferentes pasos de tinción, de esta manera se podrá evitar el innecesario arrastre de soluciones. 

Para conseguir un óptimo resultado de tinción, deberían respetarse los períodos indicados. 

Portaobjetos con corte parafínico 
Agua destilada 
1 minuto 
Solución de Azul de toluidina O 0,1 % 
10 - 20 minutos 
Agua destilada 
1 minuto 
Montar con glicerina 
o para preparados permanentes: 
Etanol 95 % 
1 minuto 
Etanol 95 % 
1 minuto 
Etanol 100 % 
1 minuto 
Etanol 100 % 
1 minuto 
Xileno 
1 minuto 
Xileno 
1 minuto 
Montar los preparados humedecidos con xileno y cubreobjetos. 

Técnica - Metacromasia 

Desparafinar de forma habitual los preparados histológicos y rehidratar en serie descendente de alcohol. 
Los portaobjetos deberían ser escurridos bien por goteo después de los diferentes pasos de tinción, de esta manera se podrá evitar el innecesario arrastre de soluciones.

Para conseguir un óptimo resultado de tinción, deberían respetarse los períodos indicados. 

Portaobjetos con corte parafínico 
Agua destilada 
1 minuto 
Solución de Azul de toluidina O 0,1 % 1) 
1 - 2 minutos 
Agua destilada 
1 minuto 
Montar con glicerina y cubreobjetos (bordear con laca para uñas incolora 
o para preparados permanentes: 
Etanol 95 % 
1 minuto 
Etanol 95 % 
1 minuto 
Etanol 100 % 
1 minuto 
Etanol 100 % 
1 minuto 
Xileno 
1 minuto 
Xileno 
1 minuto 
Montar los preparados humedecidos con xilenoy cubreobjetos. 
1) o: Solución de Azul de toluidina O 0,01 % 5 - 10 minutos 

Fuente: http://www.merckmillipore.com/ES/es/product/Toluidine-blue-O-C.I.52040,MDA_CHEM-115930


Dissoudre 2 g de bleu de méthylène et 20 g de phénol dans 100 ml d'alcool à 95%

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